欣得康药效学试验资料（山西省药品检验所）

摘要　本品2g/kg、4g/kg的剂量给荷瘤小白鼠灌服7日，对肉瘤180的抑瘤率（%）为36.2、43.5;对肝癌实体型抑制率为32.5、34.3；对宫颈癌14灌服10日抑瘤率为18.4、28.8;对艾氏腹水癌小鼠生命延长率为22、33.6。可减轻环磷酰胺对骨髓造血功能的抑制，并可增强细胞免疫功能。

试验目的

　　本药为经验方，研制者在临床用于上消化道癌症有一定疗效，现通过实验动物的移植性肿瘤，观察用药后的抑瘤、扶正和与化疗药物合用之作用。

试验材料

　　药物：试验用品浸膏粉由张怀义提供，临用时加水制成一定浓度的混悬液供灌胃。注射用环磷酰胺（cy），上海第十二制药厂930912批，加氯化钠注射液溶解，配成2.5mg/ml的溶液，供腹腔注射。氟尿嘧啶注射液，上海旭东海普药业公司,940705批，加生理盐水稀释为2.5mg/ml，皮下注射。

　　动物：昆明种小白鼠，本所动物室繁殖或山西医学院动物室提供。瘤源引自山西省肿瘤研究所。小鼠宫颈癌U14与肝癌Heps实验，由天津市医药科学研究所进行。

试验方法和结果

　　一、抑瘤试验

1．对小鼠肉瘤180(S180)的作用

给小鼠1侧腋部皮下注入S180腹水稀释液0.2ml，   (约含瘤细胞106)次日随机分为5组，每日给药1次，连续7日。停药后次日处死小鼠，称体重，剥离皮下瘤块，称瘤重，比较给药组和对照组之间的差异，计算抑瘤率并进行显著性测验。同法重复试验3次，求出3次平均抑瘤率。结果见表1。本药1，2，4g／kg剂量的抑瘤率分别为33.6、36.2和43.5％。

2．对小鼠肝癌(Heps)实体型的作用

给小鼠接种瘤源后次日，灌胃给药，每日1次，连续7日。分为2g／kg及4g／kg两个剂量组，以及空白对照和阳性药阿霉素对照组。结果见表2。本药高低剂量抑瘤平均达到34.3和32.5％，且统计处理差异显著。

3.   对小鼠宫颈癌（Ｕ14）的作用

　　给小鼠接种瘤源后次日，分为４和2g/kg剂量组，灌胃给药，每日1次，连续10日。试验重复１次，结果见表3。本药高、低剂量两次平均抑瘤率为28.8和18.4%。

4.   对小鼠艾氏腹水癌（EAC）的作用

给小鼠腹腔注入EAC腹水稀释液0.2ml(约含106癌细胞)次日随机分为5组，每日给药1次，连续7日。停药后观察各鼠死亡时间，比较组间差异，计算生命延长率并进行显著性检验。试验重复3次。从表4可见本药1、2、4g／kg剂量，存活时间3次平均延长率分别为17、32和33.6％。

二、减毒试验

1.对环磷酰胺抑制的EAC小鼠白细胞和骨髓有核细胞数的影响

按常规接种法，给小鼠腹腔注入EAC腹水稀释液0.2ml，次日分组并灌服本药9日。第7、8日腹腔注射环磷酰胺100mg/kg，第9日眼眶静脉采血测白细胞，处死后剥离一侧股骨，用3％醋酸液10ml冲出骨髓内细胞，按白细胞计数法，将所得数×2.5×104，即为一根股骨中的骨髓有核细胞数。从表5可见，本药的服用可逆转环磷酰胺使白细胞与骨髓有核细胞下降的反应，4g／kg剂量的作用与单用环磷酰胺组比较，n=10,与CY组比较，*P＞0.05* * *P＜0.01其差异有非常显著的意义。

2．对环磷酰胺抑制的正常小鼠白细胞和骨髓有核细胞数的影响

小鼠随机分组，给本药不同剂量，每日1次，共10日。第8、9日腹腔注射环磷酰胺100mg/kg，第10日灌服本药后1h，眶静脉丛采血，测白细胞，处死后，剥离一侧股骨，如上法计数骨髓有核细胞。结果见表6，本药可缓解环磷酰胺对白细胞和骨髓有核细胞的抑制作用，高剂量较为显著。n=10,与CY组比较，* *P＜0.05

三、对荷瘤鼠免疫功能影响

1．对小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响

按常规法给小鼠接种S180腹水稀释液0.2ml，次日随机分为5组，1组对照，3组灌服本药不同剂量，另1组腹腔注射CY25ml／kg，共给药7日。给药第2日尾静脉注射10％羊红细胞生理盐水液0.2ml致敏，第7日以20％羊红细胞生理盐水液0.02ml注入右后爪皮下，对侧注入同量生理盐水。24h后测量两足爪厚度，其差值代表细胞免疫的强度。从表7可见，本药可增强细胞免疫的水平，而CY则为抑制。　　n=10, 与盐水组比较，* *P＜0.05,*P＞0.05

2．对小鼠溶血素生成的影响

给雄性小鼠接种S180腹水稀释液0.2ml，次日随机分为5组，即对照、CY、本药高、中、低剂量组，连续给药8日。于给药第2日，iPl0％羊红细胞生理盐水液(SRBC)0.2ml／只，其后6日，眶静脉丛采血，分离血清，盐水稀释100倍，取此稀释血清lml与10％SRBC0.5ml、10％豚鼠血清0.5ml混合，依常法进行溶血素测定。表8结果说明本药对溶血素抗体生成无明显影响，而CY则为抑制。

与对照组比较，*P＞0.05,***P＜0.01

讨论与小结

根据中草药对实体瘤的抑制率大于30％，经统计学处理有显著差异，连续3次，作用稳定，则评定此药有一定疗效的原则，可以认为本药对小鼠S180、Heps瘤谱有抑瘤作用，而对U14的效力则较差，对EAC的生命延长率达不到50％的要求，说明各种动物移植瘤对抗癌药的敏感性是不同的。本试验所用的阳性对照药氟尿嘧啶对EAC的生命延长亦很低，原因待查。

对大剂量环磷酰胺(大于抑瘤试验量4倍)所致正常与荷瘤小鼠的毒性反应，即白细胞与骨髓有核细胞数的大量减少，本药有缓解、逆转之效，同时还能提高细胞免疫水平，说明本药与抗癌化疗药联合应用时，可以减轻其骨髓造血功能受损的毒性反应，并可发挥本药固有的扶正祛邪作用。